Выделения из подмышек человека при нанесении на женщин-реципиентов изменяют продолжительность и сроки менструального цикла. Считается, что эти эффекты возникают в результате воздействия феромонов, которые вырабатываются в подмышечной впадине. Феромоны могут влиять на эндокринные (праймерные) или поведенческие (высвобождающие) реакции, обеспечивать информирование (сигнализатор) или, возможно, даже изменять эмоции или настроение (модулятор). В этом исследовании мы извлекли выделения подмышек из прокладок, которые носили мужчины, и поместили экстракт под нос женщин-добровольцев, контролируя уровень ЛГ в сыворотке крови и эмоции/настроение. Импульсы ЛГ являются отличными индикаторами высвобождения ГнРГ из гипоталамуса головного мозга. У женщин положительное влияние ГнРГ на ЛГ влияет на продолжительность и сроки менструального цикла, что, в свою очередь, влияет на фертильность. Здесь мы показываем, что экстракты мужских подмышечных выделений оказывают прямое влияние на ЛГ-пульсацию и настроение женщин. У наших испытуемых предполагаемый мужской феромон (ы) ускорял наступление следующего пика ЛГ после его применения, снижал напряжение и усиливал расслабление.
Эти результаты демонстрируют, что мужские подмышечные выделения содержат один или несколько компонентов, которые действуют как праймеры и модуляторы феромонов.
Исследование:
18 гетеросексуальных женщин были включены в протокол, который был одобрен Институциональным наблюдательным советом Пенсильванского университета.
Испытуемым был проведен гинекологический осмотр и мазок Папаниколау, у каждой женщины был собран полный анамнез. Каждая испытуемая соответствовала следующим критериям:
1) находилась между 21 и 45 лет (медиана и средний возраст: 27 лет и 28,2 ± 5,7 года соответственно);
2) имела регулярные менструальные циклы продолжительностью от 25 до 35 дней в предыдущем году (по самоотчету);
3) имела стабильные физические нагрузки и режим сна;
4) не принимала никаких
гормональных препаратов в течение 3 месяцев, предшествовавших исследованию;
5) прошла обычный
медицинский осмотр исключающий акне, гирсутизм или галакторею и имела массу тела в пределах 15% от нормы в соответствии с таблицами Metropolitan Life. (Metropolitan Life Insurance Co., 1960);
6) имела нормальные показатели функции щитовидной железы;
7) имела уровень пролактина в сыворотке крови <15 нг/мл;
8) была гетеросексуальная.
Все испытуемые демонстрировали нормальную обонятельную способность.
Исследование проводилось в течение трех менструальных циклов, описанных ниже как базовый, тестовый и заключительный цикл.
Базовый цикл:
Начиная с первого или второго дня менструации, испытуемые каждое утро регистрировали свою базальную температуру тела в календаре.
Утренние образцы мочи проверялись на ЛГ ежедневно, чтобы определить время овуляции. Примерно через 7 дней после овуляции измеряли уровень прогестерона в сыворотке крови; для включения испытуемых в исследование требовался уровень >4 нг/мл.
Тестовый цикл:
Базальная температура тела, определение овуляции и показатели прогестерона лютеиновой фазы регистрировались также, как и в базовом цикле. В течение первых 7 дней после начала тестового цикла испытуемые были госпитализированы в Общий клинический Исследовательский центр (GCRC) при больнице Пенсильванского университета в течение 12-часового периода. За это время испытуемые получали 0,5 мл контрольного раствора (этанол) или мужского экстракта, наносимого на область носа и верхней губы каждые 2 часа ватным диском. И экстракт, и контроль были ароматизированы так, чтобы они были неразличимы. Образцы крови (-5 мл) забирались через гепариновый затвор каждые 10 мин.
Медсестры, которые брали кровь и наносили вещества, так же как и испытуемые, были слепы к природе применяемых материалов.
Поскольку у нас не было априорных знаний о потенциальных долгосрочных последствиях мужских экстрактов по параметрам пульсации ЛГ половине женщин был назначен контрольный период в течение первых 6 ч пребывания в GCRC, а в течение последних 6 ч был назначен мужской экстракт, другая половина получала лечение в обратном порядке.
Заключительный цикл:
В качестве проверки любых изменений в продолжительности менструального цикла пациенток наблюдали в течение дополнительного цикла с помощью измерения базальной температуры тела и уровня ЛГ в моче точно так же, как это было во время их базового цикла.
Уровни прогестерона лютеиновой фазы измеряли через 7-10 дней после того как произошла овуляция.
Мужской экстракт и контрольные растворы экстракта были созданы с использованием подмышечных выделений от четырех до шести доноров мужского пола. Выделения собирали на ватные диски. В ходе этого исследования были использованы три экстракта.
Все доноры мужского пола были здоровы и находились в возрасте от 22 до 45 лет. Все они отказались от использования дезодорантов/антиперспирантов и мылись только обычным мылом практически без запаха в общей сложности 4 недели.
Из подмышечных впадин брали мазок и оценивали запах. Подмышечные мазки использовались для получения бактериальных культур и определения типа и количества эндогенных кожных бактерий. После этого испытуемые собирали подмышечные выделения на ватные диски три раза в неделю. Все прокладки были заморожены (-10°C) до извлечения. Доноры-мужчины не имели контактов с реципиентами-женщинами и не были знакомы с ними.
У нас не было никаких знаний о структурной природе активных подмышечных компонентов; следовательно, мы произвольно решили стандартизировать все экстракты до 0,5 пг/мл 3-метил-2-гексеновой кислоты (3M2H), основной аналитической отдушки, обнаруженной в мужских подмышечных экстрактах. Это было сделано следующим образом: половину каждого экстракта концентрировали до -10 мл, а порцию в 5 мкл анализировали методом газовой хроматографии/масс-спектрометрии, согласно предыдущим исследованиям, для определения концентрации 3M2H.
После количественного определения концентрации 3M2H порции концентрированного экстракта добавляли к более разбавленному экстракту таким образом, чтобы концентрация 3M2H в экстракте, который должен быть применен к субъектам, составляла -0,5 мкг/мкл.
Затем экстракт ароматизировали дезодорантом, поставляемым подразделением Mennen компании Colgate-Palmolive (Пискатауэй, Нью-Джерси), до концентрации 0,005%. Аналогичный объем этанола использовали для разбавления ароматизатора до 0,005% для использования в качестве контроля.
Анализ настроения:
Через 1 и 4 часа после каждого 6-часового сеанса воздействия испытуемых просили выставить оценки по 7-балльной шкале типа Лайкерта по следующим показателям: энергичность, чувственность, напряжение, усталость, спокойствие, сексуальность, тревожность, утомленность, расслабленность и активность. Испытуемым было разрешено самостоятельно интерпретировать эти прилагательные.
Горизонтальные шкалы, каждая на отдельном листе бумаги, были составлены от 1 с надписью “Я совсем не…” до 7 с надписью “Я чрезвычайно…»
Прилагательные оценивались путем обведения цифры по одной за раз. После заполнения каждой анкеты медсестра собирала бланки, чтобы субъекты не могли ссылаться на предыдущие оценки.
Уровни ЛГ и определение его пульса:
Каждый образец крови наших испытуемых был проанализирован на ЛГ с использованием стандартного иммунорадиометрического анализа.
После забора образцам крови давали постоять на льду в течение 30 минут, а затем центрифугировали. Сыворотку отделяли и замораживали при температуре – 20°C до проведения анализа. Минимальный определяемый уровень ЛГ составлял 0,1 млУ/мл крови. Анализы образцов сыворотки крови из групп от трех до шести испытуемых проводились в разное время в ходе этого исследования. Коэффициент вариации для анализа был рассчитан для каждой “партии” образцов путем анализа объединенного образца сыворотки, легированного стандартами. Коэффициент вариации варьировался от 2,8% до 12,3% в ходе этого исследования.
Местоположение, амплитуда и частота импульсов LH в данных были определены с использованием программного обеспечения для обнаружения импульсов кластерного анализа Urban et al..
Результаты:
Восемнадцать овулирующих гетеросексуальных женщин завершили протокол. Возраст женщин варьировался от 25 до 45 лет. Последующие интервью со всеми испытуемыми показали, что ни одна из них правильно не угадала истинную природу раздражителей, которые доставлялись в их носовую область. Все испытуемые получили “алкоголь” и/или “аромат”. Никто не догадался, что были применены экстракты пота подмышечной секреции, когда им стало известно об этом в конце интервью. Не было отмечено никаких изменений в продолжительности менструального цикла, связанных с нашим 6-часовым применением экстракта.
По сравнению со средней задержкой до следующего импульса во время контрольных применений (59 ± 5 мин) экстракты из подмышечных впадин мужчин сокращали время до следующего импульса ЛГ в среднем на 20% (до 47 ± 5 мин).
Сокращение времени между воздействием экстракта и началом следующего импульса ЛГ было наиболее эффективным после первых двух применений и предполагает, что может возникнуть рефрактерный период после повторного воздействия мужских стимулов. По сравнению с контрольным состоянием, мужской экстракт не влиял на среднее количество импульсов ЛГ, среднюю амплитуду импульсов ЛГ или базальный уровень ЛГ.
Среднее количество импульсов утром не отличалось от количества во второй половине дня. Мы также рассмотрели возможность того, что суточное влияние может быть ответственно за задержку до следующего импульса ЛГ, которая наблюдалась после применения мужского экстракта.
Женщины были менее напряжены и более расслабленны во время воздействия экстракта самца относительно контрольного стимула. Никаких других эффектов на настроение отмечено не было.
Воздействие на настроение, по-видимому, специфично для мужского экстракта: женщина-медсестра находилась в тесном контакте с испытуемыми на протяжении всего эксперимента, однако эффект улучшения настроения был отмечен только во время применения мужского экстракта.